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《中国现代医学杂志》2012年 第29期 | 陈琦 吴清明 程静 马松林 龙辉 武汉科技大学医学院预防医学系 武汉科技大学附属天佑医院消化内科
摘　要：目的研究冬凌草甲素(oridonin,ORI)对人食管癌细胞(ECCs)株Eca-109中食管癌干细胞的放射增敏作用。方法 32μg/mL冬凌草甲素处理的Eca-109细胞给予不同剂量照射,MTT法检测细胞增殖抑制作用,克隆形成实验检测细胞放射敏感性和克隆形成能力,流式细胞仪检测p75NTR的表达。结果实验组和对照组增殖抑制率组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。克隆形成实验放射增敏比为2.35。随着照射剂量的增加,实验组和对照组p75NTR的表达均呈增加趋势;0、2和4 Gy剂量照射后实验组p75NTR的表达均少于对照组。结论 ORI对Eca-109细胞有明显的增殖抑制作用和放射增敏作用,其增敏机制可能与增加食管癌干细胞的放射敏感性有关。

冬凌草甲素注射剂诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其机制研究
《中草药》2011年 第10期 | 季宇彬 冮剑 高世勇 哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心
摘　要：目的研究冬凌草甲素注射剂诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及与细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的关系。方法 MTT法检测冬凌草甲素注射剂对SGC-7901细胞的细胞毒活性;倒置显微镜观察冬凌草甲素注射剂对细胞形态学的影响;流式细胞术测定细胞凋亡率;激光共聚焦显微术检测SGC-7901细胞[Ca2+]i的变化;JC-1单染,激光共聚焦显微术检测SGC-7901细胞中线粒体膜电位的变化。结果冬凌草甲素注射剂对SGC-7901细胞的IC50为21.74μmol/L;作用48 h后,细胞生长密度变疏,细胞皱缩,其中冬凌草甲素注射剂高浓度组大部分细胞破碎。冬凌草甲素注射剂5.5、11、22μmol/L作用24 h后SGC-7901细胞凋亡率分别为7.07%、18.57%、22.96%;钙离子荧光强度高于对照组;线粒体膜电位荧光强度显著低于对照组。结论冬凌草甲素注射剂通过升高SGC-7901细胞[Ca2+]i诱导细胞凋亡。

冬凌草甲素诱导HepG2肝癌细胞凋亡机制的研究
《中国现代中药》2010年 第12期 | 黄健 魏秀岩 孙博航 吴立军 池岛乔 沈阳药科大学中药学院 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 沈阳药科大学中日医药研究所
摘　要：目的:研究冬凌草甲素(oridonin)诱导HepG2凋亡的分子机制。方法:MTT法、Hoechst33258荧光染色、流式细胞分析法和Western blot分析法。结果:冬凌草甲素诱导HepG2细胞发生死亡呈时间和浓度依赖性,其作用24h的半数有效抑制浓度IC50=(29.7±1.5)μmol.L-1。Hoechst33258荧光染色证明冬凌草甲素诱导HepG2细胞发生了凋亡;30μmol.L-1冬凌草甲素作用于HepG2细胞使之产生大量的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),p53抑制剂PFTα显著地抑制了ROS的产生,从而抑制了细胞凋亡的发生;在HepG2细胞中,30μmol.L-1冬凌草甲素促进了Bax的表达,抑制了Bcl-2的表达,同时线粒体下游蛋白caspase-9,-3的抑制剂明显地抑制了30μmol.L-1冬凌草甲素诱导的HepG2细胞凋亡。结论:冬凌草甲素通过p53蛋白诱导ROS的产生,从而导致HepG2细胞凋亡,除此之外冬凌草甲素还通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。


冬凌草甲素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡及对G_2/M细胞周期的阻滞作用
《山东大学学报：医学版》2011年 第2期 | 齐晓丽 田克立 张典瑞 徐霞 冯飞飞 任桂杰 苑辉卿 褚倩倩 张强 山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所 山东大学药学院药剂教研室 北京大学药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对胰腺癌PANC-1细胞生长抑制以及促进凋亡的机制。方法采用MTT还原法检测冬凌草甲素对PANC-1细胞生长的抑制作用;碘化丙啶(PI)染色和Hoechst33342染色法观察细胞形态学的变化;PI染色流式细胞术检测细胞周期分布;膜联蛋白V(Annexin V)/PI双标流式细胞术测定凋亡细胞比率;分光光度法检测Caspase-3酶活性;Western blotting法测定Caspase-3酶原(pro-caspase-3)、Bax和Bcl-2蛋白的表达变化。结果冬凌草甲素对胰腺癌细胞PANC-1具有明显的生长抑制作用,并呈现明显的剂量依赖性;细胞形态学观察发现,冬凌草甲素可诱导PANC-1细胞凋亡;细胞周期被阻滞在G2/M期,细胞凋亡率随药物浓度的增加而增加;Caspase-3酶原被激活;Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达无明显变化。结论冬凌草甲素可通过G2/M细胞周期阻滞和诱导凋亡抑制胰腺癌细胞PANC-1的生长,其分子机制可能是通过改变Bax/Bcl-2的表达比率,激活Caspase-3,从而促进PANC-1细胞发生凋亡。

冬凌草甲素诱导胃癌BGC-823细胞凋亡及G_2/M细胞周期阻滞作用研究(英文)
《中国药学：英文版》2007年 第4期 | 韩健 叶敏 乔雪 吴婉莹 曲桂芹 果德安 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室
摘　要：目的研究冬凌草甲素体外诱导胃癌BGC-823细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用,阐明其作用机理,为临床应用提供科学依据。方法用MTT方法测定冬凌草甲素体外抑制BGC-823细胞生长的作用。用共聚焦荧光显微镜和流式细胞仪分别观察诱导凋亡的情况。线粒体膜电位和细胞内钙离子浓度分别用荧光探针标记后流式细胞仪测定。凋亡和细胞周期相关蛋白的表达用Western blotting进行测定。结果冬凌草甲素对BGC-823细胞的半数生长抑制浓度IC50值为22.21μmol•L–1,并诱导细胞凋亡,呈现浓度依赖性。此外,能够降低线粒体膜电位,升高细胞内钙离子浓度,激活caspase-3前体。同时,冬凌草甲素能够使得BGC-823细胞阻滞在细胞周期的G2/M期,伴随有cyclinA蛋白的表达下降。在发生凋亡和细胞阻滞之前,观察到p53蛋白的表达增加。结论冬凌草甲素能够诱导BGC-823细胞产生凋亡,并使细胞周期阻滞在G2/M期。其凋亡机理与caspase-3的激活,p53蛋白表达上调及cyclinA表达下调相关。

冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的影响及机制研究
《中草药》2018年 第3期 | 李春雨 王琪 申珅 李国霞 天津医科大学国际医学院 同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科
摘　要：目的研究冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的抑制作用及其作用机制。方法采用细胞培养技术体外培养A375细胞,用不同浓度冬凌草甲素处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖率;划痕实验分析细胞的迁移能力;Transwell小室实验研究细胞的侵袭能力;黏附实验评价细胞的黏附能力;Western blotting法检测转录因子Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。结果冬凌草甲素对A375细胞48 h半数抑制浓度(IC50)为47.94μmol/L;与对照组比较,5、10、20μmol/L冬凌草甲素可明显降低A375细胞的体外迁移、侵袭及黏附能力(P<0.05),且具有量效关系。冬凌草甲素作用于细胞后,E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P<0.05),Snail、N-cadherin、vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论冬凌草甲素具有体外抑制A375细胞侵袭和转移的作用,其机制可能与调控上皮-间质转化(EMT)及MMPs有关。

冬凌草治疗老年晚期食管癌临床观察
《中华实用诊断与治疗杂志》2011年 第8期 | 周丽 周建炜 梁振宇 欧阳荣 郑州市第九人民医院内科 河南省人民医院肿瘤内科 郑州大学第四附属医院普外科
摘　要：目的：观察冬凌草用于治疗老年晚期食管癌的效果。方法：76例老年晚期食管癌患者分为治疗组54例,对照组22例。治疗组给予冬凌草糖浆30 mL/次,4次/d,三餐后及睡前口服,6个月为1个疗程。1个疗程后行食管镜和X线胸片/CT检查示病变缩小或稳定者,继续治疗1个疗程后改为20 mL/次,4次/d维持治疗。对照组拒绝任何抗肿瘤治疗。随访观察2组6,12个月生存率、生存时间,并进行比较。结果：治疗组6,12个月生存率分别为66.7%和31.5%;对照组分别为40.9%和9.1%,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗组生存时间7.8-14.0个月,中位生存时间10.9个月;对照组生存时间4.5-5.9个月,中位生存时间5.2个月,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：冬凌草用于治疗老年晚期食管癌有一定效果。

冬凌草甲素诱导前列腺癌PC-3细胞自噬作用的实验观察
《中华医学杂志》2010年 第42期 | 叶利洪 陈永良 陶水祥 蒋小强 李王坚 钱卫良 何建松 浙江省绍兴县中心医院泌尿外科 312030
摘　要：目的 观察冬凌草甲素（ORI）诱导前列腺癌PC-3细胞自噬,探讨ORI抗前列腺癌的可能机制.方法 实验应用MTT检测细胞存活率、扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构变化、AO染色法观察细胞胞质中酸性泡囊（acidic vesicular organells,AVO）、Western印迹检测MAPI-LC3蛋白水平、RT-PCR技术检测自噬基因beclin 1 mRNA水平.结果 MTT结果显示ORI能有效抑制PC-3细胞增殖,并呈现显著的剂量和时间依赖效应,15 μmol/LORI作用细胞24 h,增殖抑制率达（39.95±3.05）%,48 h后达（51.28±2.91）%.浓度增加至25 μmol/L,抑制率达到（67.94±4.78）%.ORI处理细胞24 h,扫描电镜下观察到细胞缩小变圆,表面微绒毛消失.透射电镜发现细胞核固缩,染色质边集,且胞质中出现大量双层膜包裹形成的自噬体,内含细胞器或胞质.AO染色可见胞质中AVO的形成.Western印迹结果显示ORI促进LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化,ORI处理后LC-Ⅱ蛋白水平升高,LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值下降.RT-PCR结果显示自噬抑制剂3-MA能阻止ORI引起的beclin 1 mRNA水平上调.结论 冬凌草甲素能抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,并通过上调beclin 1的mRNA水平诱导细胞发生自噬.本课题为冬凌草甲素抗肿瘤机制研究提供了新思路.

冬凌草对酒精性肝损伤模型大鼠炎性因子及肝功能的影响
《中国生化药物杂志》2015年 第10期 | 宋琪雯 刘智 孙为民 谭蓉 黄勇 贵州医科大学药剂教研室 贵州医科大学附属医院药剂科 贵州医科大学制剂工程教研室
摘　要：目的研究冬凌草对酒精性肝损伤模型大鼠炎性因子及肝功能的影响。方法选择SD大鼠120只,随机分为对照组、模型组以及治疗组,各40只,采用酒精灌胃的方式建立酒精性肝损伤模型,给予冬凌草治疗。采用电化学发光法检测血清中AST、ALT、α-GST、GLDH含量,荧光定量PCR检测肝脏组织中NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果模型组大鼠血清中AST、ALT、α-GST、GLDH含量及肝脏组织中NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的含量均显著高于对照组(t=12.030~37.417,P<0.05);治疗组大鼠血清中AST、ALT、α-GST、GLDH含量及肝脏组织中NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的含量均显著低于模型组(t=5.128~32.325,P<0.05)。结论酒精灌胃能够造成肝损伤,冬凌草治疗有助于减轻肝损伤,缓解炎症反应。

冬凌草甲素诱导前列腺癌PC-3细胞自噬作用的实验观察
《中华医学杂志》2010年 第42期 | 叶利洪 陈永良 陶水祥 蒋小强 李王坚 钱卫良 何建松 浙江省绍兴县中心医院泌尿外科 312030
摘　要：目的 观察冬凌草甲素（ORI）诱导前列腺癌PC-3细胞自噬,探讨ORI抗前列腺癌的可能机制.方法 实验应用MTT检测细胞存活率、扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构变化、AO染色法观察细胞胞质中酸性泡囊（acidic vesicular organells,AVO）、Western印迹检测MAPI-LC3蛋白水平、RT-PCR技术检测自噬基因beclin 1 mRNA水平.结果 MTT结果显示ORI能有效抑制PC-3细胞增殖,并呈现显著的剂量和时间依赖效应,15 μmol/LORI作用细胞24 h,增殖抑制率达（39.95±3.05）%,48 h后达（51.28±2.91）%.浓度增加至25 μmol/L,抑制率达到（67.94±4.78）%.ORI处理细胞24 h,扫描电镜下观察到细胞缩小变圆,表面微绒毛消失.透射电镜发现细胞核固缩,染色质边集,且胞质中出现大量双层膜包裹形成的自噬体,内含细胞器或胞质.AO染色可见胞质中AVO的形成.Western印迹结果显示ORI促进LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化,ORI处理后LC-Ⅱ蛋白水平升高,LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值下降.RT-PCR结果显示自噬抑制剂3-MA能阻止ORI引起的beclin 1 mRNA水平上调.结论 冬凌草甲素能抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,并通过上调beclin 1的mRNA水平诱导细胞发生自噬.本课题为冬凌草甲素抗肿瘤机制研究提供了新思路.

冬凌草甲素对人乳腺癌Bcap-37细胞的增殖抑制作用及其机制
《苏州大学学报：医学版》2010年 第3期 | 杜海爽 郭玲玲 顾振纶 蒋小岗 苏晓燕 郭次仪 苏州中药研究所 苏州大学医学部病理学与病理生理学系 香港保健协会
摘　要：目的观察冬凌草甲素对人乳腺癌细胞株Bcap-37细胞的生长抑制作用,初步探讨冬凌草甲素调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法 MTT比色法检测冬凌草甲素对Bcap-37细胞的增殖抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期分布,RT-PCR检测p21、cdc2和cyclin B1 mRNA表达。结果冬凌草甲素对Bcap-37细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖趋势(P<0.01);处理后的Bcap-37细胞发生明显的形态改变;作用24h后,Bcap-37细胞在G2/M期阻滞;冬凌草甲素作用Bcap-37细胞后,p21 mRNA水平的表达增加,而cdc2、cyclin B1 mRNA的表达降低(均P<0.05)。结论冬凌草甲素可抑制乳腺癌细胞的增殖,该作用可能与p21 mRNA表达上调及cdc2、cyclin B1 mRNA表达下调有关。

冬凌草甲素抗Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病效应的实验研究
《中华血液学杂志》2012年 第6期 | 郭勇 单卿卿 龚玉萍 林娟 杨曦 周睿卿 四川大学华西医院血液科 成都610041
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对Ph染色体阳性（Pb＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）的抗白血病效应及其机制。方法以Ph＋ALL细胞株SUP—B15为研究对象，应用改良MTT法测定冬凌草甲素对SUP—B15细胞增殖的影响，计算72h的半数抑制浓度（IC50）；光学显微镜下观察冬凌草甲素处理后SUP—B15细胞的形态学变化；用流式细胞术检测药物作用前后SUP—B15细胞的凋亡率；以K562细胞为对照，应用Westernblot法比较药物作用前后SUP—B15细胞Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导通路活化水平，以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果①冬凌草甲素呈浓度及时间依赖地抑制SUP—B15细胞增殖，作用72h的IC50值为（7．08±1．21）μmol／L；②冬凌草甲素处理24h后光学显微镜下SUP—B15细胞边界不清晰，部分细胞崩解；③0、5、10μmol／L冬凌草甲素作用24h后，SUP—B15细胞凋亡百分率分别为（6．67±0．83）％、（18．30±1．79）％、（37．63±7．12）％；④冬凌草甲素明显抑制SUP-B15细胞ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5多条信号转导通路的活化；下调SUP．B15细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素通过抑制ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导，以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗Ph＋ALL作用。

冬凌草甲素下调NF-κB/COX-2降低人胃癌HGC-27细胞侵袭能力
《中国热带医学》2017年 第2期 | 万磊 熊晓炎 尹霞 吴正刚 谭诗云 汉川市人民医院消化内科 武汉大学人民医院消化内科
摘　要：目的观察天然植物冬凌草提取物冬凌草甲素对胃癌HGC-27细胞侵袭能力的作用,并分析其可能的作用机制。方法体外培养HGC-27细胞,分别加入0、20、40、80μmol/L浓度的冬凌草甲素作用24 h,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;ELISA法检测细胞上清液中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量;采用Western blotting检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、p-NF-κB(p65)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。结果经冬凌草甲素处理后,穿过Trasnwell小室基底膜的细胞数随着浓度的增加而逐渐减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-9表达下调,p-NF-κB(p65)、COX-2的表达及PGE2合成降低(P<0.05)。结论冬凌草甲素可能通过抑制p-NF-κB、COX-2、PGE2、MMP-9表达来降低HGC-27细胞侵袭能力。

冬凌草提取物对四氯化碳诱导的小鼠慢性肝损伤的保护作用
《时珍国医国药》2010年 第3期 | 姚会枝 李吉学 郑海娜 河南大学药学院 河南大学药物研究所
摘　要：目的观察冬凌草提取物对四氯化碳致小鼠慢性肝损伤的影响。方法小鼠皮下注射20%CC l4花生油溶液造成慢性肝损伤,末次给药24 h后测定血清中主要生化指标,以及观察肝组织病理学变化。结果冬凌草提取物能够显著降低血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平,降低总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和丙二醛(MDA)的含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,减轻肝组织变性、坏死程度,缓解肝组织的病理改变。结论冬凌草提取物对四氯化碳致小鼠慢性肝损伤有保护作用。

冬凌草甲素诱导乳腺癌Bcap37细胞凋亡的探索
《浙江理工大学学报：自然科学版》2013年 第3期 | 余越美 严巧灵 章康健 岳学田 周秀梅 浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所
摘　要：探讨冬凌草甲素(oridonin)对人乳腺癌细胞Bcap-37的增殖、凋亡以及引起细胞凋亡机制。以不同浓度的Ori处理Bcap-37细胞,通过MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞分析术检测细胞凋亡;Western Blot检测细胞发生凋亡的机制。结果是48～96μmol/L的Ori可显著抑制Bcap-37细胞的增殖(P<0.05)。48μmol/L的Ori作用24h后,细胞的增值抑制率达到了40%,而96μmol/L的Ori只需处理12h,增值抑制率竟达到了50%。96μmol/L Ori处理24h后,Bcap-37细胞的凋亡率为21.6%。Western Blot检测到了Fas的上调,细胞色素c的释放和随后Caspase 9的激活及其下游信号蛋白Caspase 3和它的底物PARP,ICAD的剪切。进一步检测到Survivin的下调和GADD34的上调。基于这些实验结果,推测冬凌草甲素作为一种潜在的抗乳腺癌制剂,诱导乳腺癌细胞Bcap37发生凋亡的发生可能与Survivin和GADD34相关。

冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用
《热带医学杂志》2006年 第3期 | 张俊峰 刘加军 陈规划 刘培庆 林东军 肖若芝 李旭东 黄仁魏 中山大学附属第三医院肝移植中心 中山大学附属第三医院血液肿瘤科 中山大学药学院
摘　要：目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用。方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡。结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系。结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物。

冬凌草甲素对甲状腺癌细胞放射敏感性的影响及机制
《中国老年学杂志》2020年 第1期 | 黄清波 淄博市第一医院药学部
摘　要：目的研究冬凌草甲素(Ori)对甲状腺癌BCPAP细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法不同浓度Ori干预或Ori联合X射线照射干预甲状腺癌BCPAP细胞和正常甲状腺Nthy-ori 3-1细胞,克隆形成实验检测细胞存活分数,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力。将BCPAP细胞分为二甲基亚砜(对照)组、5μmol/L Ori干预(Ori 5μmol/L)组、4 Gy X射线照射(IR)组、5μmol/L Ori干预联合4 Gy X射线照射(Ori 5μmol/L+IR)组,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western印迹法检测p53、p21、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酶蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9蛋白表达。在5μmol/L Ori干预联合4 Gy X射线照射后给予细胞外信号调节激酶(ERK)通路激活剂丙二醇甲醚酯酸酯(PMA)处理,MTT法检测细胞活性,Western印迹法检测ERK、磷酸化(p)-ERK蛋白表达。结果Ori能抑制BCPAP和Nthy-ori 3-1细胞存活分数,降低细胞活力,增加BCPAP细胞放射敏感性。5μmol/L Ori干预联合4 Gy X射线照射可有效诱导BCPAP细胞周期停滞及细胞凋亡(P<0.05),促进p53、p21、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达(P<0.05),抑制CDK1、Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。给予PMA干预后BCPAP细胞活力显著回升(P<0.05)。结论Ori通过调节细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白诱导BCPAP细胞周期停滞及凋亡,通过抑制ERK通路增加细胞放射敏感性。

冬凌草甲素对骨肉瘤细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的机制研究
《中药新药与临床药理》2013年 第1期 | 唐新桥 朱宝玉 王万春 湘潭市中心医院骨科 中南大学湘雅二医院骨科
摘　要：目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞端粒酶活性的变化;Z-IETD-fmk阻断试验检测Caspase-8阻断前后,冬凌草甲素对MG-63细胞凋亡影响的变化。结果冬凌草甲素增加G0/G1期MG-63细胞百分率,降低S期MG-63细胞百分率;浓度依赖性抑制MG-63细胞的CyclinD1、Survivin和Bcl-2蛋白表达,上调P21和Bax蛋白表达;浓度依赖性抑制MG-63细胞端粒酶的活性;Z-IETD-fmk阻断Caspase-8活性后,能部分逆转和减弱冬凌草甲素对MG-63细胞的凋亡诱导作用。结论冬凌草甲素通过影响细胞周期调节蛋白、阻断细胞周期G1/S期"稽查点";抑制Survivin、Bcl-2,上调Bax;抑制端粒酶活性以及活化Caspase-8等途径抑制MG-63细胞增殖及诱导MG-63细胞凋亡。

田基黄、冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞系CNE细胞毒作用的研究
《齐齐哈尔医学院学报》2005年 第12期 | 肖大江 朱国臣 王晓岚 张亚男 黄红宇 南京医科大学附属无锡第二医院耳鼻咽喉头颈外科 江南大学医学院药理学教研室 苏州大学附属无锡第四医院科教科 南京医科大学附属无锡第二医院中心实验室
摘　要：目的观察田基黄、冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞系CNE细胞生长增殖的影响。方法利用SRB法显色和光镜观察不同浓度田基黄、冬凌草甲素对CNE细胞的细胞毒作用。结果田基黄、冬凌草甲素对CNE细胞生长有明显的抑制作用,且抑制率均随着浓度的增加而增加。结论田基黄、冬凌草甲素可能对鼻咽癌有较好的治疗作用。

冬凌草单药及与化疗合用治疗食管癌205例
《世界华人消化杂志》2007年 第23期 | 樊青霞 王瑞 王瑞林 郑州大学第一附属医院肿瘤科
摘　要：目的:观察冬凌草单药及与化疗合用治疗食管癌的临床疗效.方法:448例患者,均经病理细胞学和X线检查确诊为食管癌.其中早期癌76例,均采用冬凌草单药治疗.晚期癌372例,167例采用冬凌草单药治疗,205例采用冬凌草与化疗合用.结果:用冬凌草单药治疗早期食管癌患者3,5,10,13 a的生存率明显高于未治疗组(98.68% vs 51.52%,84.02% vs 28.62%,63.49% vs 11.45%,50.13% vs 8.59%;P<0.001).对于晚期食管癌,冬凌草联合化疗应用,其总有效率明显高于以PYM(BLM)为基础的单一化疗(66.82% vs 42.85%,P<0.01).冬凌草与化疗合用组与单一化疗对照组相比副作用基本相同,无明显差异(P>0.05).结论:对于早期食管癌患者,冬凌草能控制疾病发展延长生存时间;对于晚期食管癌患者,冬凌草能增强化疗的作用.

冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制

《中华实验外科杂志》2016年 第3期 | 邵换璋 许隽颖 丁军利 阮婷彦 陈敏斌 陆培华 郑州大学人民医院(河南省人民医院)重症医学部 450003 南京医科大学附属无锡市人民医院肿瘤科 无锡214023 江苏大学附属昆山市第一人民医院肿瘤科 昆山215300
摘　要：目的探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制。方法浓度为1—50μmol／L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA（siRNA）的结肠癌细胞，噻唑蓝（MTY）法观察冬凌草甲素对结肠癌细胞活力的影响，Western blot检测冬凌草甲素作用的HT-29细胞中腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化AMPKα（p-AMPKα）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、磷酸化ACC（p-ACC）、磷酸化p53（p-p53）、磷酸化S6K（p-s6K）及磷酸化S6（p-S6）的表达。结果冬凌草甲素具有抑制结肠癌细胞活力的作用，其抑制作用呈时间剂量曲线，50μmol／L的冬凌草甲素作用HT-29细胞72h后的细胞活力最低，为21．6％。随着作用时间和剂量的增加，HT-29细胞P—AMPKot、p-ACC和p-p53蛋白表达逐渐增加，p-S6K及P—S6的蛋白表达减弱。转染AMPKotsiRNA的结肠癌细胞活力为（73．3±2．8）％，明显高于转染错义siRNA组的细胞活力[（19．5±1．2）％]，两组间差异有统计学意义（P〈0．05），p-AMPKα、p-ACC、AMPKα和p—p53蛋白表达强于转染错义siRNA组，而p—S6的蛋白表达弱于转染错义siRNA组。结论冬凌草甲索通过AMPKα活化通路抑制HT-29细胞活力。冬凌草甲素抑制结肠癌细胞活力与p-AMPKot、p-p53蛋白激活及p-S6K与p-S6的蛋白抑制相关，p53、S6可能是冬凌草甲素抑制结肠癌细胞p-AMPKα活化通路的下游蛋白。

冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制
《中华实验外科杂志》2016年 第3期 | 邵换璋 许隽颖 丁军利 阮婷彦 陈敏斌 陆培华 郑州大学人民医院(河南省人民医院)重症医学部 450003 南京医科大学附属无锡市人民医院肿瘤科 无锡214023 江苏大学附属昆山市第一人民医院肿瘤科 昆山215300
摘　要：目的探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制。方法浓度为1—50μmol／L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA（siRNA）的结肠癌细胞，噻唑蓝（MTY）法观察冬凌草甲素对结肠癌细胞活力的影响，Western blot检测冬凌草甲素作用的HT-29细胞中腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化AMPKα（p-AMPKα）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、磷酸化ACC（p-ACC）、磷酸化p53（p-p53）、磷酸化S6K（p-s6K）及磷酸化S6（p-S6）的表达。结果冬凌草甲素具有抑制结肠癌细胞活力的作用，其抑制作用呈时间剂量曲线，50μmol／L的冬凌草甲素作用HT-29细胞72h后的细胞活力最低，为21．6％。随着作用时间和剂量的增加，HT-29细胞P—AMPKot、p-ACC和p-p53蛋白表达逐渐增加，p-S6K及P—S6的蛋白表达减弱。转染AMPKotsiRNA的结肠癌细胞活力为（73．3±2．8）％，明显高于转染错义siRNA组的细胞活力[（19．5±1．2）％]，两组间差异有统计学意义（P〈0．05），p-AMPKα、p-ACC、AMPKα和p—p53蛋白表达强于转染错义siRNA组，而p—S6的蛋白表达弱于转染错义siRNA组。结论冬凌草甲索通过AMPKα活化通路抑制HT-29细胞活力。冬凌草甲素抑制结肠癌细胞活力与p-AMPKot、p-p53蛋白激活及p-S6K与p-S6的蛋白抑制相关，p53、S6可能是冬凌草甲素抑制结肠癌细胞p-AMPKα活化通路的下游蛋白。

冬凌草甲素诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡及其机制
《山东大学学报：医学版》2010年 第8期 | 林涛 李刚 刘青林 王敏卿 王俊涛 冯进波 山东大学齐鲁医院神经外科 山东大学齐鲁医院心血管重构与功能实验室
摘　要：目的研究冬凌草甲素对人脑胶质瘤U251细胞体外生长抑制及诱导凋亡的作用及其机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对U251细胞的生长抑制作用;倒置显微镜法和荧光显微镜Annexin V-FITC/PI双染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Realtime PCR法检测冬凌草甲素作用U251细胞后的bcl-2、bax及caspase-3基因表达水平的变化。结果冬凌草甲素对U251细胞有明显的生长抑制作用(P<0.05),呈明显的时间和浓度效应关系。冬凌草甲素作用U251细胞24h后出现明显的细胞凋亡形态学改变。随着冬凌草甲素作用浓度增加,凋亡和坏死细胞数均增加,浓度越高,诱导细胞凋亡的作用越明显(P均<0.05)。随着冬凌草甲素作用时间延长,U251细胞的bax和caspase-3基因的表达逐渐增强,bcl-2基因的表达逐渐减弱(P均<0.05)。结论冬凌草甲素能诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡,其凋亡机理可能与bax和caspase-3基因表达的上调,bcl-2基因表达的下调相关。

YAP-c-Myc信号通路抑制涉及冬凌草甲素抗神经胶质瘤作用
《中国药理学通报》2021年 第3期 | 王宸 陈爽 马晓娇 校欢 邱红梅 重庆医科大学药理学教研室 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室 重庆400016
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对神经胶质瘤U87细胞增殖、迁移和凋亡影响及其作用机制是否涉及抑制YAP-c-Myc信号通路。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对U87细胞活力的影响;划痕试验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测caspase-3、Bcl-2、Bax、YAP、c-Myc mRNA的表达;Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax、YAP、p-YAP(Ser127)、c-Myc蛋白的表达。结果冬凌草甲素呈剂量依赖性抑制神经胶质瘤U87细胞增殖(P<0.05)及迁移(P<0.01);流式细胞术分析细胞凋亡率明显增加(P<0.01);caspase-3 mRNA和蛋白表达均增高(P<0.05),Bcl-2/Bax mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),YAP、c-Myc的mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),p-YAP的蛋白表达增高(P<0.05)。结论冬凌草甲素可促进神经胶质瘤U87细胞增殖、迁移并促进胶质瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制YAP信号通路相关。

冬凌草甲素抑制人宫颈癌HeLa细胞生存、迁移、侵袭的活性研究
《世界科学技术：中医药现代化》2020年 第9期 | 刘艺 郭金兴 牡丹江医学院药学院 牡丹江157011 牡丹江医学院附属红旗医院 牡丹江157011
摘　要：目的观察冬凌草甲素对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法体外培养HeLa细胞,以细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度(0、10、20、40、80、160μmol•L^(-1))的冬凌草甲素对HeLa细胞处理不同时间(12 h、24 h和36 h)的细胞活力的影响。以0(对照组)、10、20、40μmol•L^(-1)冬凌草甲素处理HeLa细胞24 h,TUNEL染色和AnnexinV-FITC/PI双染法分别检测HeLa细胞凋亡,细胞粘附实验检测HeLa细胞粘附力,划痕修复实验检测HeLa细胞迁移能力,Transwell小室体外侵袭实验检测HeLa细胞侵袭能力,Western blot分析检测Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin及下游靶分子原癌基因(C-myc)、细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白的表达。结果冬凌草甲素以浓度-时间依赖效应的方式抑制HeLa细胞细胞活力(P<0.05)。与对照组比较,10、20、40μmol•L^(-1)冬凌草甲素组显著升高HeLa细胞凋亡率和凋亡指数(P<0.05);与对照组比较,10、20、40μmol•L^(-1)冬凌草甲素组显著降低HeLa细胞黏附率、迁移率和侵袭率(P<0.05);与对照组比较,10、20、40μmol•L^(-1)冬凌草甲素组显著降低HeLa细胞β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白表达(P<0.05)。结论冬凌草甲素具有抑制HeLa细胞增殖的作用,亦可诱导凋亡及抑制迁移和侵袭能力,并抑制Wnt/β-catenin信号通路。

冬凌草甲素与奥沙利铂联合应用抑制结肠癌肝转移的实验研究
《吉林中医药》2021年 第6期 | 杨鹏 赵美兰 杨宇慎 赵雪峰 大连大学附属新华医院 辽宁大连116021
摘　要：目的探讨冬凌草甲素与奥沙利铂联合应用对裸鼠结肠癌肝转移模型的转移抑制。方法利用HT29人结肠癌细胞株建立裸鼠肝转移模型1周后,按尾静脉注入成分不同,随机分成6只冬凌草甲素单一应用组[100 mg/(kg•d),OD组]、6只奥沙利铂单一应用组[5 mg/(kg•d),Oxa组]、6只冬凌草甲素与奥沙利铂联合应用组[OD-100 mg/(kg•d)plus Oxa-5 mg/(kg•d),OD加Oxa组]及6只对照组(RPMI 1640100μL,Control组)。分组制模3周后处死,观察各组药物干预后的转移情况。结果各组裸鼠结肠癌肝转移模型成功率为100%(24/24)。与Control组相比,OD组、Oxa组及OD加Oxa组均可显著降低或减少肝质量、血性腹水、胆汁淤积及肝转移评分,而OD加Oxa组更能显著抑制肝转移形成,差异有统计学意义(P<0.05)。Control组局部浸润发生率、淋巴结转移率及腹膜种植转移率有增高趋势,但其差异无统计学意义(P>0.05)。结论冬凌草甲素与奥沙利铂联合药物干预可大幅度增加转移抑制效果,至于具体的转移机制有必要进行临床试验的量化指标来判定转移抑制效果。

冬凌草甲素靶向Sema4D抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖的机制研究
《中华中医药杂志》2021年 第7期 | 何国浓 贺志良 王邦才 丁静 沈洁如 史国军 王培劼 钟光辉 浙江中医药大学附属宁波中医院 宁波315010
摘　要：目的:初步探讨冬凌草甲素靶向Sema4D抑制非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖的作用机制和途径。方法:构建稳定过表达Sema4D慢病毒和阴性对照病毒的A549细胞株。实验分4组:稳定过表达Sema4D的A549细胞为过表达组,加入3.125μg/mI冬凌草甲素千预的稳定过表达细胞为给药组,稳定过表达阴性对照病毒的细胞为阴性对照组,未转染慢病毒的A549细胞为空白对照组。通过实时细胞分析系统检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;qRT-PCR和W estern Blot分别检测各组Sema4D、PlexinB1、c-Met的mRNA和蛋白质表达水平。结果:增殖曲线显示:与空白对照组比较,阴性对照组无显著性差异,过表达组略有上升,给药组略有下降。CI值显示:与空白对照组和阴性对照组比较,过表达组48、72、96h CI值显著升高(P<0.01),给药组的48h CI值显著降低(P<0.01);与过表达组比较,给药组48、72、96h CI值显著降低(P<0.01)。gRT-PCR和Westerm Blot结果显示:与空白对照组和阴性对照组比较,过表达组的Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);给药组的Sema4D mRNA表达显著升高(P<0.01);Sema4D、PlexinB1蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与过表达组比较,给药组的Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:冬凌草甲素可能通过下调Sema4D表达,减少Sema4D与PlexinB1结合,抑制c-Met信号途径,从而抑制A549细胞的增殖,发挥抗NSCLC的作用。

冬凌草甲素诱导结直肠癌细胞SW-1116凋亡与衰老的体内外实验研究
《上海交通大学学报：医学版》2010年 第6期 | 高丰厚 郭竹英 徐芒华 王世婷 上海交通大学医学院第三人民医院实验中心
摘　要：目的探讨冬凌草甲素(Ori)在体内外抑制结直肠癌细胞的作用及机制。方法应用不同浓度Ori(0、6.25、12.5、25、50和100μmol/L)处理结直肠癌细胞SW-1116及其建立的裸鼠移植瘤模型,CCK-8法检测Ori对SW-1116细胞的抗增殖效应;流式细胞仪检测Ori处理SW-1116后细胞周期的改变及细胞的凋亡;β-半乳糖苷酶染色检测Ori诱导SW-1116细胞衰老;软琼脂细胞克隆形成实验检测Ori对SW-1116细胞克隆形成的影响;观察Ori对SW-1116细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制。结果 Ori可诱导结直肠癌细胞SW-1116生长抑制、细胞周期阻滞、凋亡、衰老和克隆形成能力。Ori还显著抑制SW-1116裸鼠移植瘤的生长,随着Ori剂量的增加裸鼠移植瘤中的细胞凋亡与衰老增加。结论体内外实验研究表明,Ori具有抗结直肠癌的活性,可能成为治疗结直肠癌的一个新的候选化合物。

冬凌草甲素对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制研究
《中草药》2012年 第3期 | 王汉楚 沙丽晓 陈小燕 周莉 郑飞云 温州医学院附属第一医院妇产科 温州市第三人民医院妇产科 温州医学院
摘　要：目的探讨冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制。方法通过大剂量冲击法,诱导制备耐紫杉醇的人卵巢癌HO-8910PM细胞株(HO-8910PM/PIX),用不同浓度冬凌草甲素处理HO-8910PM/PIX细胞;或在冬凌草甲素作用HO-8910PM/PIX细胞前以NF-κB激活剂TPA进行预处理。给药后,细胞经DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测卵巢癌细胞中NF-κB蛋白的表达。建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。接种后8周,观察冬凌草甲素对裸鼠皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中NF-κB的阳性表达。结果与对照组相比,冬凌草甲素呈浓度相关性抑制卵巢癌HO-8910PM/PIX细胞增殖,显著诱导细胞凋亡,而TPA可显著削弱冬凌草甲素诱导细胞凋亡的作用。与HO-8910PM细胞相比,NF-κB在HO-8910PM/PIX细胞中表达显著上调,冬凌草甲素可抑制HO-8910PM/PIX细胞中NF-κB的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,明显减弱移植瘤组织中NF-κB的阳性表达。结论冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制NF-κB的表达而实现。

冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭及lncRNA CCAT1表达的影响
《吉林大学学报：医学版》2021年 第2期 | 王景 刘晶 魏旭静 杜亚飞 房桂英 李林 河北医科大学第一医院妇产科 河北石家庄050000
摘　要：目的:探讨冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭的影响,阐明其可能机制。方法:取对数生长期的子宫内膜癌HEC-1B细胞分为对照组(DMSO培养液)、阳性对照组(2.5 mg•L~(-1)顺铂)、低剂量(10μmol•L~(-1))冬凌草甲素组、中剂量(20μmol•L~(-1))冬凌草甲素组和高剂量(40μmol•L~(-1))冬凌草甲素组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测HEC-1B细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测各组HEC-1B细胞中长链非编码RNA (lncRNA)结肠癌相关转录因子1 (CCAT1)表达水平。结果:与对照组比较,阳性对照组和低、中及高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05);细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05);HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。与低剂量冬凌草甲素组比较,中和高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05),HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。与中剂量冬凌草甲素组比较,高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05),HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。结结论论:冬凌草甲素可以抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进子宫内膜癌HEC-1B细胞凋亡,其作用机制可能与下调lncRNA CCAT1表达水平有关。

冬凌草甲素下调N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(pp-GalNAc-T14)表达对肾癌细胞的体外抑制作用
《复旦学报：医学版》2012年 第3期 | 李鑫 郭剑明 徐凯 王国民 复旦大学附属中山医院急诊科 复旦大学附属中山医院泌尿外科 复旦大学附属中山医院妇产科
摘　要：目的探讨冬凌草甲素下调N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(polypeptide N-acetylgalactosaminy-transferase 14,pp-GalNAc-T14)表达对人肾癌细胞的体外抑制作用。方法收集20例根治性肾癌切除标本的肾癌组织和相对应的癌旁正常组织,用RT-PCR法检测肾癌组织和癌旁正常肾组织中pp-GalNAc-T14mRNA的表达情况;用单四唑(MTT)法观察冬凌草甲素对该细胞系(786-0人肾透明细胞癌细胞系)的抑制杀伤效果,并运用RT-PCR法检测用药前后pp-GalNAc-T14mRNA的表达情况。结果 (1)肾癌组织和正常肾组织中pp-GalNAc-T-14mRNA均有表达,扫描定量显示pp-GalNAc-T14mRNA的表达在肾癌组织中较正常肾组织高34.91%(P<0.05)。(2)冬凌草甲素作用于786-0细胞后,细胞中pp-GalNAc-T14表达较空白对照组24h下降15.98%、48h下降44.30%、72h下降58.61%,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)冬凌草甲素可以抑制肾癌细胞的增殖,随着冬凌草甲素剂量的增加和作用时间的延长,其抑制细胞增殖作用逐渐增强,呈明显的时间剂量依赖性。16μmol/L的冬凌草甲素引起的生长抑制明显高于8μmol/L的抑制率(P<0.05),最高可达90%以上。结论 pp-GalNAc-T14通路与肾癌的发生可能有关;冬凌草甲素可以下调O-糖链的起始糖基化转移酶pp-GalNAc-T14的表达,产生抑制肾癌细胞的作用;冬凌草甲素可能成为RCC治疗的新策略。

冬凌草甲素通过miR-217/ABCC1通路对索拉非尼耐药的肝癌细胞Huh-7/Sor增殖、凋亡的影响
《现代药物与临床》2021年 第3期 | 安丽丽 周静 驻马店市中心医院药学部 河南驻马店463000
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对人肝癌细胞Huh-7索拉非尼(Sor)耐药细胞株Huh-7/Sor的影响及其作用机制。方法体外培养Huh-7/Sor细胞株,qRT-PCR检测miR-217和ABCC1 mRNA的表达水平,Western blotting检测ABCC1蛋白的表达水平;用冬凌草甲素处理Huh-7/Sor细胞后,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡蛋白和ABCC1的表达水平;数据库预测miR-217与ABCC1的结合位点,转染miR-217 mimic或inhibitor后检测ABCC1的蛋白水平,荧光素酶报告基因检测ABCC1 3‘UTR区域活性。结果与Huh-7细胞相比,Huh-7/Sor细胞中miR-217的表达水平显著下调,ABCC1的表达水平显著上调(P<0.05);冬凌草甲素能抑制Huh-7/Sor细胞的增殖,促进细胞凋亡,上调miR-217的表达水平,抑制ABCC1的表达(P<0.05);miR-217能与ABCC1 3‘UTR区域结合,抑制ABCC1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论冬凌草甲素能通过上调miR-217而抑制ABCC1的表达,进而抑制Huh-7/Sor细胞增殖,诱导凋亡。

基于Wnt信号通路抑制的冬凌草甲素抗乳腺癌研究
《浙江中医药大学学报》2014年 第11期 | 岳静 陈如意 洪姣 贵志芳 张婷 任军 许健 浙江中医药大学医学技术学院 杭州市肿瘤医院
摘　要：[目的]探究冬凌草甲素对乳腺癌MCF-7细胞生长及Wnt信号通路的影响。[方法]MTT法检测冬凌草甲素对乳腺癌MCF-7细胞活度的影响,流式细胞术检测冬凌草甲素对乳腺癌MCF-7细胞周期、细胞凋亡的影响,免疫蛋白印记法检测冬凌草甲素对乳腺癌MCF-7细胞Wnt通路相关蛋白Wnt4、GSK3β和β-catenin表达的影响。[结果]冬凌草甲素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性、浓度依赖性;冬凌草甲素阻滞MCF-7细胞于G2/M期,且可诱导其凋亡;冬凌草甲素可下调Wnt4、GSK3β、β-catenin的表达。[结论]冬凌草甲素可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,且影响了Wnt信号通路。

冬凌草甲素对胰腺癌细胞骨架蛋白F-actin的影响
《中国癌症杂志》2015年 第1期 | 刘军楼 沈洪 徐力 杨继兵 于希忠 孙志岭 南京中医药大学第一临床医学院
摘　要：背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,DAPI染色法染色后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态学变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,25、50μmol/L冬凌草甲素给药组早期凋亡的百分率显著高于对照组(3.78±0.46,9.51±0.63 vs 0.73±0.06,P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(14.40±1.78,20.53±2.54 vs 4.16±0.31,P<0.05)。细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚状态。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白F-actin解聚。

冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用
《中国组织工程研究与临床康复》2010年 第27期 | 刘晓丹 刘文达 王春芝 徐妍 林东军 刘培庆 黄河清 吴传斌 肖若芝 黄仁魏 刘加军 中山大学附属第三医院血液科 中山大学附属第三医院输血科 中山大学药学院药理学与毒理学实验室
摘　要：背景：已有研究证明,冬凌草乙素可以通过诱导许多实体肿瘤的细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,目前,冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的作用尚未见资料报道。目的：观察冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的体外增殖抑制作用及其机制。方法：以不同浓度的冬凌草乙素（10~50μmol/L）作用于体外培养的HL-60细胞24,48,72h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测Caspase-3及其裂解底物多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）表达水平的变化,并对细胞周期调节蛋白P21、P16的表达水平进行检测。结果与结论：冬凌草乙素可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系。流式细胞术检测结果表明细胞主要被阻滞在G0/G1期,50μmol/L的冬凌草乙素作用48h后可以出现典型的亚G1期峰（细胞凋亡峰）。免疫印迹法检测结果显示Mr32000的Caspse-3酶被活化出现Mr20000亚单位片段,同时Caspse-3的底物PARP被裂解出现Mr89000的亚单位片段,免疫印迹法检测结果还显示50μmol/L的冬凌草乙素作用不同时间后,细胞周期调节蛋白P21及P16的表达水平逐渐升高。结果提示冬凌草乙素在体外对HL-60细胞具有显著的细胞周期阻滞作用,并诱导细胞发生凋亡,通过上调细胞周期调节蛋白P21及P16的表达水平及激活Caspse-3可能是冬凌草乙素引起HL-60细胞G0/G1阻滞及诱导细胞发生凋亡的重要作用机制之一。

冬凌草甲素对肝癌HepG2细胞株体外放射增敏作用
《齐鲁医学杂志》2007年 第4期 | 王昊 于洪升 薛宏伟 青岛大学医学院附属医院肿瘤科
摘　要：目的观察冬凌草甲素对肝癌细胞株体外的放射增敏作用。方法对肝癌细胞系(HepG2)进行克隆形成实验。照射前用1.804、3.608、5.412、7.216、18.040μmol/L冬凌草甲素处理HepG2细胞6～72h,然后分别给予0、1、2、3、4、5、6Gy的^(60)Co照射,观察细胞存活率,计算放射增敏比(SER)。并运用常规照射剂量2Gy时的放射增敏比(SERSF2)作为评价指标。结果冬凌草甲素可提高HepG2细胞的放射敏感性,并呈时间、浓度依赖关系。照射前用1.804μmol/L冬凌草甲素处理HepG2细胞6～72h,在6、12和24h未观察到放射增敏作用,放射增敏作用仅在48和72h出现。当高浓度冬凌草甲素(18.040μmol/L)处理HepG2细胞6、12和24h,各时间点均可见放射增敏效应。结论冬凌草甲素可能是一种肝癌放射增敏剂。

冬凌草甲素对人乳腺癌细胞侵袭的抑制作用及机制
《苏州大学学报：医学版》2012年 第3期 | 彭延延 施秋萍 杨大朋 王海啸 马长艳 南京医科大学发育遗传学系
摘　要：目的检测冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MDA-MB 231侵袭的影响并探讨其作用的分子机制。方法用Transwell实验检测冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MDA-MB 231侵袭的影响;明胶酶谱实验检测冬凌草甲素对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)酶活性的影响;荧光素酶报告基因实验检测冬凌草甲素对MMP-2和MMP-9启动子活性的影响。结果冬凌草甲素明显抑制MDA-MB 231细胞的侵袭,且明显下调MMP-2和MMP-9的启动子活性和酶活性(P<0.05或<0.01)。结论冬凌草甲素能显著抑制乳腺癌细胞的侵袭,且这种抑制作用可能通过下调MMP-2和MMP-9的启动子活性和酶活性而实现。

冬凌草甲素对胰腺癌SW1990细胞的抑制作用及机制
《实用药物与临床》2015年 第7期 | 王文兰 付彩文 付文浩 柳树芳 王姝莲 程三芳 涉县中医院内二科 涉县医院放射科 涉县中医院药剂科
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法以10、20、40μmol/L不同浓度冬凌草甲素(Ori)作用于胰腺癌SW1990细胞,采用CCK-8检测胰腺癌SW1990细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况;RT-PCR法检测Survivin、p21基因mRNA表达水平。结果不同浓度的Ori作用于胰腺癌SW1990细胞1、2、3 d后,胰腺癌SW1990细胞增殖抑制程度不等,药物浓度越高,抑制程度越高,两者间具有明显剂量与时间依赖性。0、10、20、40μmol/L的冬凌草甲素作用于胰腺癌SW1990细胞24 h后,凋亡率分别为0.87%±0.65%、1.85%±1.02%、5.38%±0.15%和16.60%±0.50%,出现明显的G2/M期周期阻滞。与对照组相比,10、20、40μmol/L的Ori作用于SW1990细胞24 h后,p21 mRNA表达增加,而Survivin mRNA表达下降。结论冬凌草甲素通过诱导凋亡和G2/M期周期阻滞来实现对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用,其机制可能与Survivin和p21调节信号有关。

冬凌草甲素对耐顺铂鼻咽癌细胞株HNE1/DDP凋亡的影响
《中药药理与临床》2020年 第1期 | 鲁星月 时宗芬 陈长江 朱晨露 张配 刘浩 赵素容 蚌埠医学院药学院/安徽省生化药物工程技术研究中心 蚌埠233030
摘　要：目的:探讨冬凌草甲素对耐顺铂鼻咽癌细胞株HNE1/DDP凋亡的影响。方法:MTT实验检测冬凌草甲素对HNE1/DDP细胞增殖能力的影响;集落克隆实验检测细胞集落形成能力;DAPI荧光染色法检测HNE1/DDP细胞核形态的变化;PI单染流式细胞术分析细胞的凋亡情况;检测试剂盒测定细胞内ROS的水平;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果:MTT实验结果表明,冬凌草甲素20μmol/L^50μmol/L可显著减弱HNE1/DDP细胞活力,抑制细胞增殖;相比于模型对照组,3μmol/L^5μmol/L的冬凌草甲素对HNE1/DDP细胞的集落形成能力有明显的抑制作用(P <0. 05或P <0. 01);且随着冬凌草甲素给药浓度的增加,细胞核发生明显皱缩,核碎裂增加;细胞内ROS水平明显增加;抑凋亡蛋白Mcl-1、Bcl-2表达明显下调,促凋亡蛋白Bax、Bak表达明显上调(P <0. 05或P <0. 01)。结论:冬凌草甲素能显著抑制耐顺铂鼻咽癌HNE1/DDP细胞的增殖,并诱导其发生凋亡,其作用可能是通过诱导细胞内ROS的产生,对Mcl-1、Bcl-2、Bax、Bak等凋亡相关蛋白进行调控实现的。

冬凌草甲素抑制多发性骨髓瘤细胞H929增殖和诱导凋亡的分子机制
《现代肿瘤医学》2020年 第14期 | 黄陈翼 刘宗超 马川 王振龙 刘勇 韦章超 付至江 刘世贵 西南医科大学附属中医医院 四川泸州646000
摘　要：目的:研究不同浓度的冬凌草甲素对多发性骨髓瘤细胞H929增殖和凋亡的影响及其调控机制。方法:使用不同浓度的冬凌草甲素处理多发性骨髓瘤细胞H929;利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;利用Annexin-FITC/PI双染和流式细胞仪检测细胞凋亡能力;利用蛋白印迹实验检测凋亡通路中BCL-2家族蛋白及PI3K/Akt通路中相关蛋白的表达水平。结果:细胞增殖实验结果显示冬凌草甲素显著抑制了多发性骨髓瘤H929细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性;细胞凋亡实验结果显示冬凌草甲素显著促进了多发性骨髓瘤H929细胞的凋亡,呈浓度和时间依赖性递增;蛋白印迹实验结果显示,随着冬凌草甲素浓度的增加,多发性骨髓瘤H929细胞中BCL-2蛋白、p-PI3K蛋白和p-Akt蛋白表达量递减,Bax蛋白表达量递增。结论:冬凌草甲素能有效抑制骨髓瘤H929细胞增殖,诱导细胞发生凋亡,其机制可能与PI3K/Akt信号通路的受抑及凋亡通路的活化有关。

冬凌草甲素联合卡培他滨对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响
《中华医学杂志》2017年 第46期 | 陆惠平 马芬芬 龚婧如 王斌 复旦大学附属华山医院药剂科 上海200040 上海市浦东医院药剂科
摘　要：目的观察冬凌草甲素联合卡培他滨对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法观察不同浓度（10、20及40μmol／L）的冬凌草甲素和卡培他滨及其两者联合用药与MDA-MB-231细胞孵育24和48h的细胞存活率。考察5μmol／L的冬凌草甲素和卡培他滨及其两者联合使用对MDA。MB-231细胞集落形成的影响。考察20μmol／L的冬凌草甲素和卡培他滨及其两者联合使用对MDA-MB-231细胞核形态，细胞周期及凋亡的影响。结果冬凌草甲素和卡培他滨在20μmol／L孵育48h对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为49．5％和58．6％，而将两者联合使用时，对肿瘤的抑制率达到94．6％。联合给药后肿瘤集落形成的大小和个数较单独给药时明显减少（P〈0．01）。同时给予冬凌草甲素和卡培他滨，可将细胞同时阻滞于S期和G2／M期，凋亡细胞的比例也有显著升高（P〈0．01）。结论将冬凌草甲素与卡培他滨联合给药之后，两者可以协同起效，共同发挥抗肿瘤效果，对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖起到显著的抑制作用。

冬凌草甲素对人食管鳞癌细胞系KYSE-150和KYSE-450增殖及迁移的影响
《解剖学报》2019年 第5期 | 黄坷坷 刘玉珍 陈彦民 陈智 刘丹辉 赵宝生 新乡医学院第一附属医院胸外科 河南卫辉453100 新乡医学院食管癌研究所 河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院河南省神经病学研究所 河南卫辉453100
摘　要：目的探讨冬凌草甲素(ORI)对食管鳞癌细胞系KYSE-150和KYSE-450增殖、凋亡、周期及迁移的作用。方法 MTT法检测ORI对食管癌细胞增殖的影响;集落形成实验检测ORI对集落形成的影响;流式细胞术检测ORI对食管癌细胞凋亡和周期的影响;Transwell迁移实验检测ORI对食管癌细胞迁移的作用;Western blotting检测ORI对抗凋亡蛋白Bcl-2、细胞周期抑制蛋白p21Cip1/Waf1及上皮-间质转化(EMT)标志蛋白表达水平的影响。结果 ORI对KYSE-150和KYSE-450细胞的增殖、迁移和集落形成有显著的抑制作用(P<0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖性;流式结果显示,随着ORI浓度的增加,细胞的凋亡率明显增加(P<0.05),G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05),G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05);ORI处理食管癌细胞48 h,Bcl-2、间质细胞标志蛋白,波形蛋白(vimentin)、β-连环蛋白(β-catenin)表达下调,p21Cip1/Waf1、上皮细胞标志蛋白,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达上调。结论冬凌草甲素可能通过诱导细胞凋亡,阻滞细胞在G2/M期抑制食管癌细胞的增殖,并通过抑制EMT转化从而抑制食管癌细胞的迁移。

冬凌草片辅助榄香烯膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的前瞻性临床分析
《世界中医药》2013年 第8期 | 李志强 常红娟 孙仕润 新乡医学院第一附属医院中西医结合科 新乡医学院护理学院 即墨市中医医院
摘　要：目的:观察分析冬凌草片辅助榄香烯膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的前瞻性临床疗效及安全性。方法:选取2008年6月至2010年6月我院收治的75例浅表性膀胱癌患者,均采用保留膀胱经尿道肿瘤切除术。行前瞻性、随机对照临床研究,术后将其随机分为对照组和治疗组。治疗组38例,术后口服冬凌草片,术后1周行榄香烯膀胱内灌注;对照组37例,术后1周行榄香烯膀胱内灌注。随访2年,观察患者肿瘤复发情况及不良反应。结果:对照组平均随访26.6个月,2年复发率16.22%。治疗组平均随访29.8月,2年复发率10.53%,两组患者2年复发率相比,差异有统计学意义(P<0.05)。两组间的不良反应比较无统计学意义(P>0.05)。结论:冬凌草片辅助榄香烯膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发有良好疗效,不良反应少,值得在临床广泛推广。

大剂量冬凌草联合优福定治疗晚期肺鳞癌临床研究
《实用中西医结合临床》2003年 第6期 | 蔡汝醇 郭红飞 江西中医学院附属医院肿瘤科
摘　要：目的:观察大剂量冬凌草按体表面积给药联合优福定口服治疗晚期肺鳞癌的疗效和毒性。方法:60例晚期肺鳞癌患者随机分治疗组30例予冬凌草每日359/Ⅲ煎服,优福定6～12片分3次口服;对照组30例予NP方案化疗。结果:治疗组近期疗效低于对照组,远期疗效高于对照组。结论:配合中药治疗肿瘤体现了疗效特点。

冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用
《中国当代医药》2013年 第14期 | 赵冬 刘红耀 赵唤 山西医科大学 山西医学科学院(山西大医院)泌尿外科
摘　要：目的探讨不同浓度的冬凌草甲素(ORI)在不同时间点对膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用,为临床决策提供参考依据。方法将冬凌草甲素作用于T24细胞,利用酶标仪在不同时间点(λ=570nm)测定不同浓度的冬凌草甲素吸光度,同样方式用MTT法检测细胞的抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,其数值均以均数±标准差表示,每组结果由两位研究者重复测量2次校对。结果随着培养时间的延长及浓度的增加,T24细胞的吸光度数值呈明显下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。浓度为8μmol/L时抑制率递增,16μmol/L时抑制率已接近50%,而32μmol/L时抑制率最高可达70%以上,变化显著,差异有统计学意义(P<0.05)。随时间、浓度梯度的变化,T24细胞凋亡率不断增加,最高可达60%以上,差异有统计学意义(P<0.05)。证明冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞增殖的抑制具有明显的浓度-效应与时间-效应的关系。结论冬凌草甲素可诱导膀胱癌T24细胞凋亡,有明显的抗肿瘤作用。

冬凌草甲素通过线粒体途径诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡
《医学研究杂志》2013年 第3期 | 丁笑笑 罗文达 张佳 洪叶 冯长伟 温州医学院附属浙江省台州医院
摘　要：目的研究冬凌草甲素诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的凋亡作用及其机制。方法 MTS法检测冬凌草甲素对GBC-SD细胞的生长抑制作用;瑞氏染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、caspase-3活性变化;Western blot检测caspase-9活化情况。结果冬凌草甲素能显著抑制GBC-SD细胞增殖,呈时间剂量依赖性(P<0.05)。细胞形态学观察可见冬凌草甲素可诱导细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示28μmol/L药物处理GBC-SD细胞24h后,细胞凋亡率为51.28%±2.65%。随着药物浓度增加,GBC-SD细胞线粒体膜电位逐渐下降而caspase-3活性逐渐增强,56μmol/L组caspase-3活性是对照组的11倍。Western blot分析结果显示caspase-9酶原被激活,且活化条带随药物浓度的增加而增强。结论 冬凌草甲素可能通过细胞线粒体膜电位下降激活caspase-3并最终诱导GBC-SD细胞凋亡。

冬凌草甲素促进人脑胶质瘤U251细胞放疗敏感性的研究
《解放军医药杂志》2020年 第8期 | 李长宇 宋少军 黄桂芳 祝福 曹亚雷 金茂林 冉浩男 海南省肿瘤医院神经外科 海口570100 海南省肿瘤医院放射治疗中心 海口570100
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对人脑胶质瘤U251细胞放疗敏感性的影响。方法人脑胶质瘤U251细胞随机分为对照组(脑胶质瘤U251细胞常规培养)、冬凌草甲素组(冬凌草甲素10μmol/L培养24 h)、X线照射组(21EX型双光子高能直线加速器照射)、联合放疗组(X线照射+冬凌草甲素)。观察4组人脑胶质瘤U251细胞的增殖抑制率,检测其凋亡率,分析Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平变化。结果与对照组比较,冬凌草甲素组、X线照射组及联合放疗组人脑胶质瘤U251细胞增殖率降低,且联合放疗组低于冬凌草甲素组及X线照射组(P<0.05);与对照组比较,冬凌草甲素组、X线照射组及联合放疗组人脑胶质瘤U251细胞凋亡率及凋亡相关蛋白的表达量均显著增高,且联合放疗组高于冬凌草甲素组及X线照射组(P<0.05)。结论冬凌草甲素可显著提高人脑胶质瘤U251细胞的放疗敏感性,为冬凌草甲素应用于胶质瘤的放疗提供了理论依据。

冬凌草甲素对结肠癌LOVO细胞增殖和EMT影响的实验研究
《实用肿瘤杂志》2019年 第4期 | 龙景培 卜贺启 刘殿雷 浙江大学医学院附属妇产科医院外科 浙江杭州310006 浙江省立同德医院肛肠科 浙江杭州310012
摘　要：目的探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对结肠癌细胞株LOVO细胞增殖和上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响及可能的机制。方法不同药物浓度(0、2、4、8、12和16μg/m L)冬凌草甲素处理结肠癌LOVO细胞,不同时间点(24、48和72 h)采用CCK-8法观察细胞增殖情况,RT-PCR检测E-cadherin和Vimentin mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phospharylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。结果冬凌草甲素对LOVO细胞增殖抑制率呈时间和剂量依赖性(均P<0.05)。4、8和12μg/m L冬凌草甲素作用48 h,增加LOVO细胞E-cadherin基因表达量,减少Vimentin的基因表达量(均P<0.05),也增加LOVO细胞p-GSK-3β(Tyr216)蛋白表达量,减少p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达量,同时下调β-catenin蛋白表达量(均P<0.05)。GSK-3β特定的抑制剂CHIR 2μmol/L作用1 h后,再加入12μg/m L冬凌草甲素共同作用24 h,能逆转冬凌草甲素对β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响(均P<0.05)。结论冬凌草甲素可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌LOVO细胞的生长增殖和EMT过程。

冬凌草甲素抗T细胞急性淋巴细胞白血病效应的实验研究
《四川大学学报：医学版》2014年 第6期 | 郭勇 单卿卿 龚玉萍 林娟 杨曦 四川大学华西医院血液科
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病效应及其机制。方法以T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株CEM为研究对象,应用改良MTT法测定不同浓度及不同时间冬凌草甲素对CEM细胞增殖和生存率的影响,计算72h的半数抑制浓度(IC50);显微镜下观察5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素处理24h后CEM细胞的形态学变化;流式细胞术检测0.5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞的凋亡百分率;应用Western blot法检测7.5μmol/L冬凌草甲素作用后细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白水平,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 1冬凌草甲素呈浓度及时间依赖性抑制CEM细胞增殖,作用72h的IC50值为(7.37±1.99)μmol/L;2 5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞边界不清晰,部分细胞崩解,且浓度越高,细胞形态改变越明显;3 0、5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后,细胞凋亡百分率分别为(4.8±2.11)%、(19.03±2.54)%、(40.27±3.31)%;(57.23±6.69)%;4冬凌草甲素明显抑制CEM细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白的活化;下调CEM细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素可能通过抑制mTOR/P70(4EBP1)、RAF/ERK、STAT5信号蛋白的活化,以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗白血病作用。

冬凌草甲素通过调控miRNA-125a诱导肝癌细胞HepG2凋亡的研究
《中国临床药理学杂志》2015年 第6期 | 刘伟峰 王新帅 孙君军 杨延辉 李文生 宋俊鑫 河南科技大学第一附属医院肝胆外科 河南科技大学第一附属医院肿瘤内科
摘　要：目的探讨冬凌草甲素通过调控微小核糖核酸125a(RNA-125a)诱导肝癌细胞Hep G2凋亡以及相关机制。方法冬凌草甲素(10,20,30,40,50,70,100μmol•L-1)处理Hep G2肝癌细胞24 h,用MTT法测定细胞的增殖情况;用Hoechst 33342染色检测细胞形态改变;用实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测miRNA-125a与血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白表达。结果冬凌草甲素能浓度依赖性地抑制Hep G2细胞的增殖(P<0.05),Hep G2细胞核形态明显改变;Hep G2细胞经冬凌草甲素作用24h后,miRNA-125a表达上调,而VEGF mRNA表达下调(P<0.05);而高剂量冬凌草促进miRNA-125a表达以及抑制VEGF表达的作用最显著(P<0.01)。结论冬凌草甲素可通过上调miRNA-125a,使VEGF表达减少,而诱导肝癌细胞Hep G2凋亡。

冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制
《热带医学杂志》2008年 第10期 | 刘加军 林东军 陆敏强 张俊峰 陈规划 中山大学附属第三医院血液内科 中山大学附属第三医院肝移植科
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,瑞氏染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERTmRNA表达水平的变化。结果冬凌草甲素可显著的抑制HL-60细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。冬凌草甲素作用48～60h后在瑞氏染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,同时端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论冬凌草甲素能抑制HL-60细胞的生长及诱导细胞发生凋亡;降低端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。

冬凌草甲素通过调控LncRNA-H19抑制急性髓系白血病细胞增殖和促细胞凋亡研究
《中国医药科学》2020年 第19期 | 单晓英 张祥华 王岩 山东省莒县中医医院儿科 山东莒县276500
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响并明确作用机制是否与调控LncRNA-H19表达相关。方法体外常规培养HL-60细胞,取处于对数生长期的细胞进行实验,观察不同浓度冬凌草甲素(5.0、10.0、15.0、20.0、25.0µmol/L)对HL-60细胞增殖、凋亡和LncRNA-H19 mRNA、相关蛋白表达的影响以及LncRNA-H19 siRNA对冬凌草甲素的干预作用。采用实时定量PCR法检测细胞中LncRNA-H19表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术法检测细胞凋亡,Western Blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达。结果与Control组比较,5.0~25.0µmol/L的冬凌草甲素呈浓度依赖性地抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进细胞中Caspase-3、Bax、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达,抑制细胞中Bcl-2蛋白表达以及LncRNA-H19 mRNA表达。与si-NC组比较,si-LncRNA-H19组细胞增殖率明显降低,凋亡率明显增加,Caspase-3、Bax、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显上调,Bcl-2蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论冬凌草甲素通过抑制LncRNA-H19的表达而阻止HL-60细胞增殖,促进细胞凋亡和自噬。

冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响
《中国老年学杂志》2013年 第16期 | 罗兰 侯杰 邱冰 曹惠君 魏凤香 佳木斯大学附属第一医院消化一科 黑龙江省医院 首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心 深圳市龙岗区妇幼保健院
摘　要：目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的ORI(20,40,80μmol/L)处理SW1900细胞48 h后,可发生DNA损伤,并且随浓度增加,DNA损伤加重。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论 ORI可以诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤;H2AX蛋白发生磷酸化,具体DNA损伤信号通路有待进一步研究。

冬凌草甲素对人胰腺癌细胞增殖的抑制作用及其机制
《世界华人消化杂志》2010年 第32期 | 刘军楼 汪悦 徐力 杨继兵 孙志岭 邓海山 徐建亚 南京中医药大学第一临床医学院
摘　要：目的:研究冬凌草甲素(Oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用并探究其可能的机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,双重免疫荧光染色后激光共聚集显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显增殖抑制作用.给药组细胞核DAPI染色可见典型的凋亡形态学改变,细胞质骨架蛋白β-肌动蛋白荧光染色增强,尤其是细胞中央近细胞核处荧光染色明显增强.12.5,25.0,50.0μmol/L给药组早期凋亡率显著高于未给药组(2.17%±0.57%,5.83%±0.57%,4.43%±0.78%vs0.30%±0.17%,均P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(5.10%±0.98%,7.03%±1.52%,10.13%±0.70%vs2.63%±0.06%,均P<0.05).结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物干预后引起了β-肌动蛋白聚合/解聚状态的改变.

冬凌草甲素对人胰腺癌细胞增殖的抑制作用及其机制
《世界华人消化杂志》2010年 第32期 | 刘军楼 汪悦 徐力 杨继兵 孙志岭 邓海山 徐建亚 南京中医药大学第一临床医学院
摘　要：目的:研究冬凌草甲素(Oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用并探究其可能的机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,双重免疫荧光染色后激光共聚集显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显增殖抑制作用.给药组细胞核DAPI染色可见典型的凋亡形态学改变,细胞质骨架蛋白β-肌动蛋白荧光染色增强,尤其是细胞中央近细胞核处荧光染色明显增强.12.5,25.0,50.0μmol/L给药组早期凋亡率显著高于未给药组(2.17%±0.57%,5.83%±0.57%,4.43%±0.78%vs0.30%±0.17%,均P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(5.10%±0.98%,7.03%±1.52%,10.13%±0.70%vs2.63%±0.06%,均P<0.05).结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物干预后引起了β-肌动蛋白聚合/解聚状态的改变.

冬凌草甲素诱导人肺腺癌细胞株A549凋亡及其机制研究
《抗感染药学》2010年 第2期 | 彭蕾 顾振纶 薛仁宇 周颖 蒋小岗 郭次仪 苏州大学生物化学与分子生物学教研室 苏州中药研究所
摘　要：目的:探讨冬凌草甲素(oridnin)对人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的影响。方法:利用MTT法检测oridnin对A549细胞增殖作用的影响;Hoechst33258染色观察给药后细胞形态改变;透射电镜观察给药后细胞超微结构改变;FITC-Annexin V/PI双标记检测细胞凋亡率。结果:Hoechst33258染色和透射电镜观察,oridonin给药后A549细胞出现空泡变性,染色质高度凝集;FITC-AnnexinV/PI双标记检测oridnin(25,50,100μmol/L)作用细胞48h后凋亡率分别为1.5%,6.2%,59.7%。结论:Oridonin对A549细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。

冬凌草甲素协同马法兰对人骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖和凋亡的影响
《吉林大学学报：医学版》2013年 第4期 | 郝亚宁 罗媛媛 张梅 李莎莎 西安交通大学医学院第一附属医院肾内科 西安交通大学医学院第一附属医院血液内科
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摘　要：目的:观察冬凌草甲素(oridonin)和马法兰(melphalan)单药及联合用药对人骨髓瘤RPMI-8226细胞生长、凋亡和细胞周期的影响及二者的协同作用,阐明药物联合应用对骨髓瘤细胞的毒性增强作用。方法:本实验共设4个RPMI-8226细胞处理组,即空白对照组(未加任何药物)、冬凌草甲素(10μmol.L-1)组、马法兰(30μmol.L-1)组和联合(冬凌草甲素10μmol.L-1+马法兰30μmol.L-1)组。MTT法检测各用药组作用不同时间后RPMI-8226细胞的增殖抑制率,采用两药相互作用指数(CDI)评价联合用药性质;Annexin-Ⅴ/PI双染检测细胞凋亡率;流式细胞术检测药物作用前后细胞周期分布。结果:与空白对照组比较,冬凌草甲素组、马法兰组和联合组RPMI-8226细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01),均具有时间-效应依赖性,联合组各时间点细胞增殖抑制率明显高于单药组(P<0.01)。各时间点CDI值均小于1,即冬凌草甲素可协同提高马法兰的细胞毒作用。冬凌草甲素和马法兰单独处理RPMI-8226细胞36h,细胞凋亡率分别为15.01%±0.47%和20.03%±1.30%,而联合组细胞凋亡率为43.06%±1.96%,与单药组比较显著升高(P<0.01)。流式细胞术DNA含量分析,各药物组RPMI-8226细胞主要阻滞于G0/G1期,S期细胞比例明显减少,除冬凌草甲素组S期细胞比例外,其余药物组各期细胞比例与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),联合组与单药组比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:冬凌草甲素联合马法兰通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制骨髓瘤细胞的增殖,其作用具有协同性。

冬凌草甲素联合塞来昔布对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响
《肿瘤》2015年 第3期 | 梁福东 狄淑芳 常云峰 李宏伟 王栓科 兰州大学第二医院骨科 甘肃省骨关节疾病研究重点实验室
摘　要：目的 :检测二萜类化合物冬凌草甲素联合环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)抑制剂塞来昔布对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法 :MTT法检测不同浓度的冬凌草甲素(20、40和60μmol/L)和塞来昔布(25、50和100μmol/L)单药和联合处理12和24 h后MG-63细胞的增殖抑制率;FCM法检测冬凌草甲素(40μmol/L)和塞来昔布(50μmol/L)单药和联合干预MG-63细胞后的凋亡率,并分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测对Cox-2以及凋亡调节因子[B细胞性淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和生存素(survivin)]m RNA及蛋白表达水平的影响。结果 :不同浓度的冬凌草甲素和塞来昔布单药和联合干预后,MG-63细胞的增殖明显受到抑制(P值均<0.05),呈剂量依赖性,且在低剂量和中剂量时两药有协同作用。冬凌草甲素和塞来昔布联合用药组较空白对照组和各单药组细胞的凋亡率增加(P值均<0.05)。联合用药组中Cox-2、Bcl-2和survivin m RNA及蛋白的表达水平均较空白对照组和各单药组明显下调(P值均<0.05),而Bax m RNA及蛋白的表达水平明显上调(P值均<0.05)。结论 :冬凌草甲素联合塞来昔布可协同抑制MG-63细胞,这一过程可能与Cox-2的表达受到抑制和凋亡调节因子表达水平的改变有关。

冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞生长抑制作用的研究
《浙江医学》2007年 第10期 | 施华娟 余大敏 丁国庆 马亮 金育德 白禹 李恭会 浙江大学医学院附属邵逸夫医院泌尿外科 浙江省生物治疗重点实验室
摘　要：目的探讨冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞的生长抑制作用及机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的T24细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,并应用Hoechst33258荧光染色法以流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果冬凌草甲素可显著抑制T24细胞的生长,诱导细胞凋亡,并呈现出明显的剂量-效应与时间-效应关系。结论冬凌草甲素对膀胱癌具有明显的体外抗肿瘤作用,诱导细胞凋亡可能是其重要作用机制。


冬凌草甲素诱导胶质瘤SHG44细胞凋亡及其分子机制的研究
《中国医科大学学报》2017年 第7期 | 朱莽 龙乾发 杨彦平 樊欣鑫 谢江涛 姜海涛 西安市第三医院神经外科 西安市中心医院神经外科 咸阳市中心医院神经外科 西安交通大学第一附属医院神经外科
摘　要：目的研究冬凌草甲素诱导胶质瘤SHG44细胞凋亡及其分子机制。方法采用CCK-8比色法绘制生长曲线,冬凌草甲素分别以0、1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L观察对胶质瘤SHG44细胞生长活性的影响;Hoehst33258和TUNEL染色法观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;通过Western blotting分析凋亡相关蛋白Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2在胶质瘤SHG44细胞中蛋白的表达情况。结果冬凌草甲素作用胶质瘤SHG44细胞24 h和48 h后,细胞的增殖受到明显抑制,且24 h和48 h细胞半抑制率(IC50)的浓度分别是7.865和4.74μmol/L;Hoechst33258和TUNEL染色结果发现形态发生明显改变,出现了典型的细胞凋亡变化;Western blotting检测结果显示冬凌草甲素诱导后,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,并激活了凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达。结论冬凌草甲素对胶质瘤SHG44细胞具有抑制增殖及诱导凋亡的作用,同时调控凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达。

冬凌草联合5-氟尿嘧啶和奥沙利铂治疗食管癌疗效观察
《中国误诊学杂志》2007年 第18期 | 暴希照 李国民 河南省汤阴县人民医院

冬凌草甲素对乳腺癌Bcap37细胞DJ-1蛋白表达的影响
《解剖学研究》2018年 第5期 | 覃咸雄 郭艳 恩施土家族苗族自治州中心医院乳腺外科

摘　要：目的探究冬凌草甲素对乳腺癌Bcap37细胞DJ-1蛋白表达的影响及作用机制分析。方法培养乳腺癌Bcap37细胞,设置6个组别:正常对照组、Bcap37-3μmol/L冬凌草甲素、Bcap37-30μmol/L冬凌草甲素、Bcap37-300μmol/L冬凌草甲素、Bcap37-PD98059组和Bcap37-冬凌草甲素+PD98059组。MTT法检测细胞的增殖情况;Western blot检测乳腺癌Bcap37细胞中DJ-1和Erk蛋白的表达情况。结果冬凌草甲素能有效抑制乳腺癌Bcap37细胞的增殖,且呈剂量依赖性;进一步研究结果提示,冬凌草甲素和Erk的抑制剂PD98059均能有效抑制DJ-1和p-Erk蛋白的表达,联合应用冬凌草甲素和PD98059的效果明显优于单独应用PD98059,而与单独应用冬凌草甲素的效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论冬凌草甲素能有效抑制乳腺癌Bcap37细胞的增殖,其机制可能与抑制Erk信号分子进而影响DJ-1蛋白的表达密切相关,但也存在其他的机制有待进一步研究发现。

冬凌草甲素对人肝癌细胞HepG_2缝隙连接功能的影响
《中医临床研究》2015年 第10期 | 赵增强 竺江玲 南阳医学高等专科学校
摘　要：目的：观察冬凌草甲素对人肝癌细胞Hep G2缝隙连接功能（GJIC）的影响。方法：采用划痕标记染料示踪技术（Scrape-loading Dye Transfer Assay,SL/DT）,观察不同浓度的冬凌草甲素处理人肝癌细胞Hep G2之后细胞间隙连接通讯功能。结果：空白对照组细胞的荧光染料主要出现在划痕旁1-2列细胞中（±）,且划痕两边被染色的细胞较少;细胞经冬凌草甲素处理48h后,荧光染料不仅出现在划痕的附近细胞内,而且在划痕以外的3~4列细胞内也出现了荧光（＋＋＋＋）,划痕两边被染色的细胞明显增多,出现了明显的细胞间染料传输现象,呈浓度依赖性。结论：冬凌草甲素能增强Hep G2细胞间缝隙连接功能,可能是其抗肿瘤作用机制之一。


Longikaurin A诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的初步研究
《中国实验血液学杂志》2012年 第3期 | 赵姗 普建新 孙汉董 吴英理 上海交通大学医学院病理生理学教研室 中国科学院昆明植物所
摘　要：本研究冬凌草甲素结构类似物longikaurin A对多发性骨髓瘤细胞H929的作用和机制。采用CCK-8法检测longikaurin A和冬凌草甲素对H929细胞的增殖抑制效应。在相差显微镜下观察longikaurin A处理12 h对H929细胞形态的影响;AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡的比例;Western blot检测caspase-9、caspase-3的活化水平及PARP的剪切情况;应用DCFDA探针检测2μmol/L longikaurin A处理不同时间H929细胞中活性氧的水平。结果显示,与冬凌草甲素(IC50为10.66μmol/L)相比,longikaurin A(IC50为0.85μmol/L)能够更有效地抑制H929细胞增殖;longikaurin A作用24 h,AnnexinⅤ阳性细胞比例显著升高,caspase-3、caspase-9活化,caspase-3的底物PARP发生剪切,提示longikaurin A能诱导H929细胞发生凋亡;活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸能够显著抑制longikaurinA诱导的细胞凋亡,然而longikaurin A本身并不升高活性氧水平。结论:与冬凌草甲素相比,longikaurin A在较低浓度下能够诱导多发性骨髓瘤细胞H929发生细胞凋亡。

冬凌草片治疗急性咽炎160例临床观察
《中国中医药现代远程教育》2008年 第2期 | 张嘉庆 李丽 李士瑾 河南省鹤煤集团总医院 458000 河南中医学院第一临床医学院五官学科 450000 河南省中医研究院附属医院 450004
摘　要：目的探讨冬凌草片治疗急性咽炎的临床效果,方法按疗程用药服用冬凌草片（专阳路德药业公司生产）治疗期间不服其它药物。结果治疗组服用冬凌草片按疗程用药治愈率80%,对照组口服双黄连口服液,治愈率为52.5%。结论结果表明冬凌草片治急性咽炎疗效显著,服用方便值得推广。